RAA技术检测炭疽杆菌
发布时间:2018-08-16 08:50:30         阅读量:372         来源:未知        

2018年 8 7 日以来,黑龙江省桦南、依兰、七台河三地相继出现人感染炭疽散发病例。目前,感染皮肤炭疽的 14 名病患中, 1 人已治愈出院,其余患者病情平稳并趋好。黑龙江省是自然疫源地,炭疽病例时有发生,且多为散发病例,当前黑龙江省气候潮湿、高温、多雨,适宜炭疽芽孢生长,易出现炭疽疫情。

 

图示  显微镜下染色的炭疽芽孢杆菌


炭疽是由炭疽芽孢杆菌引起的一种自然疫源性疾病,是法定乙类传染病。牛、羊等食草动物为主要传染源,人类主要通过接触炭疽病畜毛皮和食肉而感染,也可以通过吸入含有炭疽芽孢的粉尘或气溶胶而感染。临床上主要表现为皮肤坏死、溃疡、焦痂和周围组织广泛水肿及毒血症症状,皮下及浆膜下结缔组织出血性浸润;血液凝固不良,呈煤焦油样,偶可引致肺、肠和脑膜的急性感染,并可伴发败血症,故可以说炭疽杆菌是一种非常危险的细菌。


图示  炭疽感染症状


正因炭疽杆菌具有极高的危害性,研究者们一直以来都在寻找能对这种病原微生物进行有效检测的手段。归纳起来看,常见的炭疽杆菌检测方法主要有 4 类:

1) 基于芽孢的检测方法:目前,针对芽孢的检测主要是利用芽孢的物理特性、芽孢的标志物或者其抗体或配体进行的,其中,DPA( dipicolinic acid 2 6- 吡啶二羧酸)作为芽孢中必不可少的成分,常被用来作为标志物进行分析;

2) 基于细菌繁殖体的检测方法:可能是受直接对炭疽杆菌繁殖体进行操作的危险度和复杂度所限,针对繁殖体的检测方法的研究并不像针对芽孢的方法研究得那么深入和广泛,但其对准确估计炭疽杆菌的威胁可能是必要的;

3) 基于基因的检测方法:此类方法包括 PCR 技术、 LAMP 技术、 RAA 技术、基因探针技术和芯片等,大多灵敏度较高,只要条件控制合理,特异性也能达到比较理想的状态,因此受到许多研究者的青睐。其中, RAA 技术(重组酶介导的等温核酸扩增技术)因兼具快速、灵敏、特异的性质,非常适合应用于炭疽芽孢杆菌的检测;

4) 基于毒素蛋白的检测方法:作为毒血症的作用因子,毒素蛋白同样可以作为炭疽杆菌检测的靶标。通常被选作待检靶标的毒素蛋白是PA(保护性抗原)或LF(致死因子)。

图示   RAA (荧光法)原理


考虑到 RAA 技术在检测炭疽杆菌方面的优势,奇天基因基于该技术开发了针对炭疽杆菌快速检测的炭疽杆菌快速检测试剂盒( RAA 法),能实现在室温条件下、5~20 min内对炭疽杆菌的快速检测,灵敏度可达10拷贝。使用该试剂盒产品,能在短时间内为炭疽杆菌感染患者的治疗提供准确可靠的诊断结果,在临床上具有广阔的应用前景。


参考文献:刘炬 , 徐俊杰 , 陈薇 . 炭疽杆菌检测方法的研究现状与展望 [J]. 微生物学报 , 2012, 52(7):809-815.

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